一种基于光延迟的荧光寿命成像装置，包括：一激光器；一样品台位于激光器的出光光路上；一分束镜位于样品台的出光光路上；一第一耦合透镜位于分束镜的反射光路上；一反射镜位于分束镜的透射光路上；一第二耦合透镜位于反射镜的反射光路上；一第一光纤成像束位于第一耦合透镜的光路上；一第二光纤成像束位于第二耦合透镜的光路上；一窄带滤光片位于第一光纤成像束和第二光纤成像束的光路上；一像增强CCD位于且远离第一光纤成像束的窄带滤光片的一侧；一计算机，其的输入端与像增强CCD的输出端连接。本发明可以分别获取生物自体荧光物质或外源性荧光物质的瞬态或稳态荧光寿命图像。