本发明公开了一种兔源性纤维成分荧光定量PCR的定性检测方法，包括：步骤一、兔毛的DNA为模板，进行PCR扩增；步骤二、检测扩增产物的荧光信号；其中，用于PCR扩增的反应体系中含有扩增兔源性纤维成分特异性引物对和兔源性纤维成分特异性探针。本发明的方法可简便、快速的检测和鉴定纺织品中是否存在兔源性纤维成分，设计的特异性引物和特异性探针的特异性好，灵敏度佳，可检测到配比为1％(wt)的狐狸毛。