本发明涉及一种大菱鲆未受精卵的质量检测方法，当大菱鲆未受精的卵子RNA浓度在0.780±0.001μg/卵时，且Pr∶RNA∶DNA为227-250∶12-13.5∶1-1.2时，受精率和孵化率最高，此时卵子质量最佳。本发明的方法可以快速有效的对大菱鲆卵子质量进行检测，从而可以快速确定待研究的卵子是否符合生产需求，提高了生产效率，同时进一步完善了硬骨鱼类卵子质量评价体系，为研究其他养殖海水鱼类卵子质量评价提供了有效平台和借鉴。