本发明涉及一种红鳍东方魨卵巢细胞系体外构建方法及应用，构建方法步骤有：（1）原代细胞培养液的制备；（2）原代培养；（3）传代培养；（4）不同形态细胞系的分离，其应用包括有：红鳍东方魨卵巢细胞系在两种典型鱼类病毒增殖和扩繁中的应用及红鳍东方魨卵巢细胞系在转基因研究中的应用。本发明选择卵巢作为培养和建系对象旨在为研究河豚毒素的提取利用和养殖河豚鱼的安全脱毒处理搭建一个生物平台，更好的服务于传统的水产养殖业及新兴的生物医药行业。