本发明公开了一种引导尿道再生的功能性生物支架材料的制备方法及其应用。本发明的引导尿道再生的功能性生物支架材料的制备方法包括如下步骤：将间充质干细胞负载于由离体哺乳动物表皮制备的尿道状胶原管上，得到所述引导尿道再生的功能性生物支架材料。通过试验证明：本发明的引导尿道再生的功能性生物支架材料对尿道缺损组织有很好的修复作用，可以促进尿路再生。