本发明公开了一种分程胚胎培养液及其配制方法属于细胞学、生物技术领域.采用添加三种胚胎营养因子的分程培养液，包括卵裂液和囊胚液两种，在体外受精卵和在8-细胞期前后分别使用。本发明的胚胎培养液加入的胚胎营养因子具有协同增效作用，避免了分程培养液丢失胚胎自身分泌的胚胎营养因子的缺陷，受精卵在本发明的培养液中生长具有更高的胚胎干细胞多能性，其发育情况与体内胚胎生长相当，提高了受精卵体外生长发育，改善了胚胎的质量。