本发明公开了一种可促进皮肤修复与再生的美容护肤品及其制备方法和应用。该方法包括（1）配置培养液；（2）将对数期的干细胞以1x10^4/ml至1x10^6/ml的密度接种于培养液中37℃培养3-72小时；（3）采用共培养的方法，或者向细胞培养液中添加细胞因子的方法，将间充质干细胞激活使其分泌活性物质；（4）去除培养液中的细胞收获上清液，即得精华液；还包括（5）降解、制剂：将精华液进一步降解，得到适于皮肤吸收的精华液；再将该精华液加入到美容护肤品配方中制成各种不同剂型的美容护肤品。该美容护肤精华液中含细胞培养液中的营养成分，还含活性因子TIMP-1，1.0～5.0mg/L；MCP-1，100～500μg/L；EGF，5～50μg/L。本发明的美容护肤品易于被皮肤吸收，可促进皮肤修复与再生。