本发明提供了一种mRNA-DC肺癌治疗性疫苗及其增强性制备方法，方法步骤包括：获取肺癌干细胞的mRNA、以及IL-2和IFN-γ；将mRNA、IL-2和IFN-γ转染至DC中后，进行体外培养。本发明的方法过程，基于DC能够接受外源mRNA并进行翻译，以及密码子具有通用性的技术基础；以肺癌干细胞的mRNA导入后表达成抗原蛋白替换灭活蛋白刺激的方式对DC进行刺激，携带的抗原信息更为全面；而且能避免外源刺激的抗原蛋白失活、断裂等进一步会造成抗原信息缺失的不足；同时将IL-2和IFN-γ转染至DC中在免疫应答过程中即开始成熟诱导，可以大大缩短通常培养基中诱导的时间，提升细胞成熟的效率，增强了免疫反应。本发明还提出采用上述mRNA-DC肺癌治疗性疫苗与T淋巴细胞共培养所获得的细胞毒性T淋巴细胞。