本发明公开一种引导牙周组织再生术生物膜及其制备方法和应用，该方法分别培养牙周膜干细胞及制备无菌富氧的全氟三乙胺乳液，将二者混合制成每毫升全氟三乙胺乳液中10⁴-10⁸个细胞的细胞-全氟三乙胺乳液，将制得的细胞-全氟三乙胺乳液接种于生物膜片上培养，终止培养后，即得到引导牙周组织再生术生物膜。本发明的引导牙周组织再生生物膜制备方法通过改善膜内的乏氧环境，在提高牙周膜干细胞植入后早期的存活效率的同时，抑制局部厌氧菌的滋生，极大的降低了引导组织再生术的失败率，提高了成功率，具有很好的经济和社会效益。