本发明涉及一种甘蔗转基因瞬时表达叶片受体材料的制备方法，包括甘蔗叶片外植体田间采样、甘蔗叶片外植体表面消毒、甘蔗叶片外植体制备和甘蔗叶片外植体预培养。本发明的方法取代了传统的甘蔗愈伤组织为外植体，建立了快速、高效、简便的甘蔗叶片受体材料制备技术，可广泛应用于高通量的外源基因表达、启动子活性分析、基因沉默等方面的甘蔗转基因瞬时表达研究。