本发明提供了一种mRNA-DC肺癌治疗性疫苗及其制备方法，方法步骤包括：获取肺癌干细胞的mRNA；将mRNA转染至DC中；将转染有mRNA的DC进行体外培养。本发明的方法过程，基于DC能够接受外源mRNA并进行翻译，以及密码子具有通用性的技术基础；以肺癌干细胞的mRNA导入后表达成抗原蛋白替换灭活蛋白刺激的方式对DC进行刺激；其针对可能造成癌症复发并随血液转移到患者其他器官组织的肺癌干细胞，携带的抗原信息更为全面；而且自行表达生成抗原蛋白还能避免外源刺激的抗原蛋白失活、断裂等进一步会造成抗原信息缺失的不足。基于上述本发明还提出有采用上述mRNA-DC肺癌治疗性疫苗应用于CTL技术中，将其与T淋巴细胞共培养所获得的细胞毒性T淋巴细胞。