本发明公开了一种增强人类细胞中非整合性基因表达的方法。本发明公开的EBNA-D500DNA分子，该分子的序列如SEQ ID No.1所示。本发明公开的方法克服了Episomal质粒在人类细胞系中表达的效率较低这一缺陷，同时不影响其非整合性和长时间表达的特性。另外，EBNA-D500mRNA可显著提高含有Episomal质粒进行体细胞重编程的效率，可用来制作无外源基因的、安全性高的人类诱导多能干细胞，用于再生医学。