本发明属于涉及一种基因工程领域，具体涉及一种HLA-A0201限制性抗Sox2特异性CTL的制备方法及其应用。采用靶向树突状细胞上C-型凝集素受体的阳离子脂质体作为抗原载体，包裹肿瘤干细胞抗原Sox2抗原，72小时快速成熟树突状细胞并且提高树突状细胞主动摄取抗原效率和MHC-I途径抗原呈递效率，比常规的7-8天收获成熟的DC能大大缩短肿瘤患者最佳治疗的时间窗口，有利于丰富成熟的树突状细胞刺激初始T细胞的信号诱导抗原特异性CTL产生；结合工程细胞和细胞因子大量扩增抗原特异性T细胞和Tcm，产生高比例的杀伤能力更强的Tcm，增强抗肿瘤免疫作用，是一种快速有效的肿瘤干细胞抗原特异性CTL的制备技术，有极大的经济价值和市场前景。