本发明公开了一种虎斑兜兰组培快繁方法，属于植物组织培养研究领域。本方法包括如下步骤：（1）外植体灭菌，（2）种子萌发培养，（3）增殖培养，（4）分化培养，（5）生根培养，（6）炼苗移栽。适时采集虎斑兜兰蒴果，灭菌后将种子撒播到无菌萌发培养基上萌发，在不同培养阶段采用不同的培养基配方进行培养，然后通过炼苗和移栽得到健康、遗传性状稳定的优质种苗，本方法繁殖系数高，繁殖周期短，移栽成活率达92%以上，能够进行大规模商品化育苗生产，有利于虎斑兜兰野生资源的保护与开发，具有广泛的应用前景。