本发明公开了一种组织匀浆法分离胎儿附属物组织细胞构建细胞库的方法，目的在于构建细胞库时步骤简单、省时、易于质控和规范化。本发明由下述步骤组成：(1)胎儿附属物组织的清洗；(2)组织的匀浆前处理；(3)组织匀浆处理分离细胞(团)；(4)匀浆后组织的过滤处理和细胞(团)的收集；(5)细胞(团)检测；(6)冻存分离的细胞(团)，构建细胞库。与现有方法相比，本发明方法具有操作简单、用时短、不引入外源试剂、易于标准化和质量控制以及细胞获得量大等优点，为提高胎儿附属物细胞库的构建效率，获得高质量用于治疗的干细胞具有重要的意义。