本发明属于生物技术领域，涉及一种在体内精原干细胞基因组中引入随机插入突变的方法。本发明在引入插入突变时，提供了一种携带piggyBac转座子系统的非整合型慢病毒复合载体及其制备方法。本发明可用于高效地制备非人基因突变动物。通过本发明制备的基因突变动物可用于动物表型分析，基因功能研究，人类遗传疾病模拟，新药筛选和新药靶发现。