本发明提供了一种脱乙酰几丁质/羧甲基纤维素干细胞微囊及其制备和培养方法，制备方法包括：将羧甲基纤维素用质量体积分数1～2％的醋酸分散后，加入至CaCl₂溶液中进行凝胶化，形成羧甲基纤维素凝胶；将脱乙酰几丁质用醋酸盐缓冲液分散后，再加入待培养的干细胞，制成脱乙酰几丁质和细胞的混合悬液；将混合悬液加入至羧甲基纤维素凝胶中进行凝聚交联，并将凝聚交联后的得到微囊用柠檬酸钠溶液进行浸泡处理。相比聚赖氨酸/海藻酸钠细胞培养微囊，本发明包膜结构在电荷静电吸附结合的基础上，再借助于脱乙酰基、醚键修饰产生的活性集团，能够形成更加复杂的分子结构，使包膜内具有更加稳定的细胞生长环境，从而提升细胞培养的效率。