本发明利用三维胶原支架在低血清浓度下完成胶质瘤干细胞的富集培养，为胶质瘤体外试验研究提供了一种新型的，更接近体内真实环境的干细胞培养方法及应用。所述三维培养方法中选用胶原作为制作3D支架的材料，胶原是细胞外基质最主要的成分，可为细胞提供良好的粘附与迁移环境，并具有良好的生物相容性、机械强度、降解系数和低免疫原性。本发明研究多孔胶原支架三维培养对胶质瘤细胞干性的影响，探讨其机制，摸索更接近于体内肿瘤干细胞环境的靶向GSCs药物试验方法，并进行了药敏试验，继而对胶质瘤耐药机制进行进一步的研究，为丌发GSCs靶向药物提供了新的思路奠定基础，其成果具有一定的理论意义和应用价值。