本发明公开了一种斑马鱼诱导性多能干细胞的诱导方法，包括以下步骤：首先，取斑马鱼组织或斑马鱼胚胎，经过体外分离培养获得斑马鱼成纤维细胞，然后用病毒感染斑马鱼成纤维细胞，再对感染后的斑马鱼成纤维细胞进行诱导，经人工挑克隆及传代培养得到斑马鱼诱导性多能干细胞。基于同一个技术方案，同时还公开了用于该诱导方法的诱导型培养基和iPS培养基。RT-PCR分析表明，经本发明的胚胎成纤维诱导的iPS细胞具有分化为三胚层来源的各种细胞的潜能。本发明攻克了慢病毒在鱼类细胞中感染效率低的技术难点，为斑马鱼体细胞重编程机制研究提供了新的工具细胞来源以及新的思路来选择细胞材料。