本发明公开了一种抑瘤基因修饰间充质干细胞的制备方法，包括步骤：A) MSCs的分离及原代与传代的培养；B) 抑瘤基因重组载体的构建；C) 抑瘤基因在MSCs的表达及鉴定。本发明采用腺病毒载体进行目的抑瘤基因的重组，重组质粒转染MSCs后在MSCs联合表达目的基因，具有较高的感染率及共表达效率。相对于其它病毒载体，腺病毒转导效率较高，可以高效感染能分裂的干细胞，且其不整合入染色体，安全性较高。