本发明涉及一种无血清的脂肪间充质干细胞培养基，由基础培养基和添加成份组成；其中，基础培养基为DMEM-LG，添加成份及其含量如下：碱性成纤维生长因子：5-20ng/mL；表皮生长因子：5-20ng/mL；青霉素：100U/mL；链霉素：100μg/mL；肝素：50-200μg/mL；L-谷氨酰胺：2-8mM；2-巯基乙醇：100-300μM；白血病抑制因子：500-2000U/mL；丙酮酸钠：0.5-2mM。本发明无血清的脂肪间充质干细胞培养基，不含血清，可避免批间差异和血清组分对细胞培养的影响；避免血清的外源性污染和对细胞毒性作用；成分明确，有利于研究细胞的生理调节机制。