本发明公开了一种临床级别脂肪干细胞的制备和储存方法,采用无动物源蛋白质污染的无血清的完全培养基，进行脂肪组织来源的间充质干细胞培养，安全有效，无免疫原性，能更好地维持ADSCs的增殖率，平台期延长，且每代细胞扩增倍数远远提高，保证了临床治疗的数量，是第一次在制备临床级别的ADSCs中的应用无血清的完全培养基；本发明从腹部采集脂肪组织，可以间断性反复取材，避免了抽脂过程对脂肪干细胞的损伤；本发明应用贴壁法制备ADSCs，提高了原代细胞的产量，降低了成本；本发明应用新型的无血清细胞冻存液符合临床应用标准，减少了DMSO的用量，对ADSCs的活率、表型和倍增时间无明显影响，可以复苏后直接用于临床输注，便于运输，保证了临床治疗的安全性。