本发明公开了一种当归属植物贮藏根形成层的植物干细胞及其制备和培养方法，其制备方法为：将灭菌后贮藏根切片，置于筛选培养基上处理后促使根切片中非形成层细胞的部分死亡或损伤或停止生长；再将切片放入分离培养基中培养，促进形成层细胞的分裂且不使其发生脱分化，初步分离得形成层细胞；将其移至继代培养基中培养后，再移至分离培养基中重复交替地培养，直到获得一种稳定的含有大量小液泡的细胞。本发明提供的形成层干细胞培养方法有悬浮培养和发酵罐培养的方法。本发明实现了对当归属形成层干细胞的分离，并对其扩大培养提供了新的方法，对当归属植物贮藏根形成层干细胞大量的工业生产奠定了基础，也为当归属植物贮藏根形成层干细胞提供了新的细胞来源。