本发明公开了一种人骨髓间充质干细胞体外培养扩增方法，通过将DMEM培养基作为基础培养基，并依次加入L-谷氨酰胺，维生素C，胰岛素，红细胞生成素，然后以氢氧化钠调节pH值，最后加入胎牛血清并过滤除菌，得到新的培养基作为基础，再将细胞进行培养。本发明可明显提高人骨髓间充质干细胞的扩增数量和细胞活性；同时保持生物学效应及多向分化潜能；增强细胞移植修复肌体组织细胞损伤的功效；可以及时有效地为科研和临床所用。