本发明公开了促牙周膜间充质干细胞分泌抗炎因子的培养液及方法。所述培养液为含蛋白终浓度50-200μg/ml的条件培养基、10％FBS的DMEM/F12培养液，条件培养基为培养过牙周膜间充质干细胞的培养液。所述方法为：取P1-P5代的牙周膜间充质干细胞加入含10％FBS的DMEM/F12培养液于37℃、5％CO₂条件下培养，待细胞汇合度达到80-90％时，换成促牙周膜间充质干细胞分泌抗炎因子的培养液继续培养12-48h。本发明中条件培养基含牙周膜间充质干细胞本身分泌的多种细胞因子，对细胞无毒副作用，没有引入外源性物质，安全性较高，降成本低，具有更好的抗炎效果，能够促进抗炎因子的大量分泌。