本发明涉及对在细胞治疗中最为理想的脐带血间充质干细胞进行高效分离扩增的方法。已经证明脐带血中含有分化能力较高，免疫排斥反应较小的间充质干细胞。脐带血银行的建立为实现自体细胞移植提供基础。但是，由于脐带血中间充质干细胞含量极低（1×10⁸个单核细胞中仅含有0.5-30个），因此如何高效分离和扩增这些细胞成为了阻碍脐带血间充质干细胞向临床转化的难题。目前，多利用该细胞在培养皿的吸附能力，对脐带血间充质干细胞进行分离，但是成功率低，并且在扩增过程中难以保持干细胞特性。本发明包括利用蛋白成分对培养皿进行包被，配合添加多种生长因子的培养基，构建脐带血间充质干细胞扩增环境，实现了该细胞的高效扩增和分离。