本发明公开了一种人胚胎干细胞体外分化为功能性心肌细胞的新型有效培养方法，不同于传统的经典的悬滴培养方法，以一种简化的悬浮分化培养方法形成类胚体，采用无血清培养液并进行改良，其中添加了多种诱导和营养强化物质，增加心肌细胞的分化率和存活时间。本发明进一步有效地更新和完善了胚胎干细胞分化为功能性心肌细胞的方法，极大地提高拟胚体分化的心肌细胞的比例，可为干细胞临床移植治疗技术和药物筛选等提供更多的功能强大的心肌细胞来源。本发明方法操作简单易行；缩短了培养时间；增强了体外分化成心肌细胞的功能；包括搏动时间、心肌细胞跳动的自律性和节律性；可重复性强。