本发明提供一种人脂肪间充质干细胞的无血清培养基，包括DMEM基础培养基，还包括如下组分：L-谷氨酰胺、谷胱甘肽、重组人胰岛素、人血清白蛋白、转铁蛋白和1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖。本发明属于干细胞技术领域，本发明提供的人脂肪间充质干细胞的无血清培养基，能促进细胞的快速贴壁和快速增殖，保持良好的干细胞幼稚形态和干细胞特性。