本发明提供了促进多能干细胞分化成表达PDX1、NKX6.1和HB9的胰腺内胚层细胞的方法。具体地，所述方法涵盖用甲状腺激素(例如T3)、ALK5抑制剂、或甲状腺激素和ALK5抑制剂两者培养第四阶段至第六阶段的细胞。