本发明公开了一种骨髓去分化间充质干细胞的培养方法。其中包括：从人骨髓中经Ficcol分离培养获得间充质干细胞，待细胞处于生长对数期，直至细胞密度达到70%-80%时，弃去间充质干细胞培养基，更换成骨诱导培养基进行培养3-7天后，弃去诱导培养基，并以PBS清洗3次将诱导培养基残夜清除干净，将细胞重新置于间充质干细胞培养基，其中每隔2-3天更新新鲜培养基，待细胞铺满培养皿后，进行正常消化传代处理，以胰酶消化，消化时间不超过1分钟，细胞传代后继续培养直到第12-14天结束。通过更换培养基的方法获得的去分化间充质干细胞与传统的人骨髓源间充质干细胞相比，增殖效率提高，成骨分化能力增强。