本发明公开了表皮干细胞在检测化妆品及其原料细胞毒性中的应用。本发明用待检测化妆品及原料处理人皮肤来源的表皮干细胞，通过MTT比色法得出了处理后表皮干细胞的存活率情况，结果表明：当待测化妆品或其原料的浓度为0.1ug/mL时，利用表皮干细胞可以检测待测化妆品或其原料的细胞毒性，灵敏度较高。因此，人皮肤来源的表皮干细胞可作为MTT比色法检测化妆品及原料安全性的新途径。