本发明涉及生物技术领域，本发明公开了一种皮肤干细胞活性素的制备方法及其应用。本发明的活性素只从与皮肤组织有最密切关系的皮肤干细胞中提取，与其他从包含多种干细胞的杂干细胞提取的活性素不同，是更具有皮肤个性化的活性素。本发明的另一个特点是不仅从干细胞分泌物中提取，而且将皮肤干细胞破碎，从干细胞的内容物中提取活性组份，使活性组份的含量更多、更丰富。本发明的活性素可广泛用于护肤、健肤及美容化妆品。