本发明公开了一种脂肪原始间充质干细胞的增殖培养方法，包括以下步骤：将分离的单个干细胞接种于培养瓶，加入无血清培养基，细胞培养24小时首次全量换液；然后继续采用无血清培养基进行细胞培养。无血清培养基不引入外源蛋白质，使培养的细胞利于临床应用，培养24小时首次全量换液，能够充分去除残余杂细胞，有利于纯化干细胞。