本发明公开了一种利用人骨髓间充质干细胞制备视网膜色素上皮细胞的方法，通过人骨髓间充质干细胞与视网膜色素上皮细胞非接触式共培养而使所述人骨髓间充质干细胞诱导分化为视网膜色素上皮细胞；与现有技术相比，本发明通过人骨髓间充质干细胞与视网膜色素上皮细胞非接触式共培养而使所述人骨髓间充质干细胞分化为视网膜色素上皮细胞，分化的视网膜色素上皮细胞具有原代视网膜色素上皮细胞的重要表型和生理功能，而且分化时间短、分化效率高、在培养过程中无诱导细胞的混杂污染。