本发明属于干细胞技术领域，涉及一种用于制备脐带间充质干细胞的试剂盒，该试剂盒包括脐带保存液、脐带洗涤液、脐带分解液、细胞洗涤液、细胞培养液、细胞消化液、细胞冻存液；脐带保存液为含青霉素100～200ug/ml、链霉素100～200ug/ml、两性霉素2.5～5μg/ml的DMEM、DMEM/F12、MEM或RPMI-1640培养基；脐带洗涤液为含青霉素100～200ug/ml、链霉素100～200ug/ml、两性霉素2.5～5μg/ml的生理盐水、PBS、D-Hanks或HBSS；脐带分解液含为含胶原酶Ⅱ1～2mg/ml、脱氧核糖核酸酶Ⅰ0.1～0.2mg/ml的DMEM、DMEM/F12、MEM或RPMI-1640培养基；细胞洗涤液为PBS、D-Hanks或HBSS；细胞培养液为间充质干细胞无血清生长培养基；本发明的试剂盒可在较短时间获得大量脐带间充质干细胞，使用方便。