本发明涉及一种胃癌肿瘤干细胞株的培养建立，适用于细胞学、肿瘤学、免疫学、药理学、临床医学等相关领域的研究，属于细胞培养技术范畴。本发明通过对病人胃癌组织异源移植小鼠瘤块在体外的原代细胞培养、无血清细胞培养获得了肿瘤干细胞株GAM-016S。该细胞株可在无血清培养条件下形成克隆球；裸鼠腹腔注射100个克隆球细胞即可形成瘤块；流式细胞检测(FACS)和免疫组织化学(IHC)分析结果显示GAM-016S细胞系表达肿瘤干细胞标志分子CD24、CD44，但不表达CD133。GAM-016细胞株的建立对胃癌的肿瘤学研究、药物筛选、临床治疗等方面具有重要的意义和价值。