本发明提供了一种制备经血间充质干细胞的方法，包括采集女性经血为原料，无菌处理经血；分离经血中的干细胞；培养经血间充质干细胞；经血间充质干细胞的冻存；经血间充质干细胞的复苏。本发明的方法具有如下技术特点：采集女性的经血，保存液于保存液中；防范细菌污染方法，从采集源头减少污染几率，用无菌水多次冲洗采集杯的，有效减少污染几率；采用差异离心方法，尽量除去经血中的细菌；通过羟乙基淀粉（HES）对样品进行重复多次分离，可获得最大量的经血间充质干细胞；使用无血清培养基培养减少动物源成分使用，细胞性能稳定，可维持经血间充质干细胞在体外长期培养过程，维持细胞形态、增殖能力、MSC表面标记表达、分化能力等。所用到的方法简单易行，操作方便，并且能最大量获得所需的干细胞并培养成功。