一种利用胎盘间充质干细胞提高脐血间充质干细胞培养成功率的方法，首先使用Ⅰ型胶原酶短时消化胎盘小叶，得到含细胞外基质蛋白和组织块组成的糊状混合物并进行原代培养；然后用第三代胎盘间充质干细胞作为滋养细胞与分离后的原代脐血间充质干细胞在低氧条件下共培养，获取大量脐血间充质干细胞。本发明利用胎盘间充质干细胞提高脐血间充质干细胞培养成功率的方法，缩短了胎盘间充质干细胞的培养时间，有效解决了脐血间充质干细胞纯度低、增殖能力差等问题，提高了脐血间充质干细胞培养的成功率，开发了脐血间充质干细胞的利用价值。本发明未使用胎牛血清和胰酶，提高了细胞临床应用的安全性。