本发明提供一种大胚龄神经干细胞的高-低密度贴壁细胞培养方法，所述培养方法包括以下步骤：皮层神经干细胞的分离和培养，高-低密度贴壁细胞培养法培养神经干细胞，神经干细胞的传代培养，神经干细胞的单细胞克隆，神经干细胞的分化培养以及免疫荧光法检测。本发明采用无血清培养和单细胞克隆技术从13周人胚大脑皮层中分离和培养出具有自我更新和多分化潜能的神经干细胞，采用先高密度而后密度逐渐递减的高-低密度贴壁细胞培养法，形成大量神经干细胞，该细胞具有连续克隆能力，可传达培养，表达神经巢蛋白抗原；分化后的细胞表达神经元细胞、胶质细胞和少突胶质细胞的特异性抗原，解决了胚胎神经干细胞较难培养的问题。