本发明公开了一种用成纤维细胞制备神经干细胞的方法。本发明提供了一种制备神经干细胞的方法，是将离体的成纤维细胞进行悬浮培养，得到神经干细胞。本发明通过低贴附的物理方法使小鼠成纤维细胞生长为三维立体球状，从而模拟神经球的形态。实验结果表明通过三维球状培养，小鼠成纤维细胞(胚胎成纤维细胞和尾尖成纤维细胞)可以转分化为神经干细胞样的细胞。本发明提供的制备神经干细胞的方法，操作简便、成本低廉，对于神经干细胞的制备和应用具有重大价值。