制备烟酸-谷胱甘肽-三价铬离子螯合物的方法，具体涉及生物有机铬螯合物的制备方法。本发明以烟酸、谷胱甘肽及三氯化铬为原料，经配制烟酸-谷胱甘肽水溶液、制备烟酸-谷胱甘肽-Cr³⁺螯合物溶液；制备烟酸-谷胱甘肽-Cr³⁺螯合物冻干粉的简单工序制得产品。本发明方法制备出的烟酸-谷胱甘肽-三价铬离子螯合物中不含Cl^-，Cr³⁺含量达到8.95～14.63％，与天然葡萄糖耐量因子十分接近，纯度高，具有制备条件温和、操作步骤简单、产品纯度高、资源综合利用率高、环保无污染等特点。采用本方法制备的产品可作为药物、营养剂广泛用于医药、保健品、饲料添加剂等领域，能改善糖尿病人的糖代谢、提高禽畜肉质等。