1-二茂铁基-3-[（N-(2-取代苯并咪唑基)]-2-丙烯-1-酮及其制备方法和应用，以1-甲酰基-2-取代苯并咪唑和乙酰基二茂铁为反应原料，以KF-Al₂O₃为催化剂，以乙醇为溶剂，进行反应，最终得到1-二茂铁基-3-[N-（2-取代苯并咪唑基）]-2-丙烯-1-酮。本发明采用了KF-Al₂O₃作为催化剂，因此，本发明反应时间短，且产率良好；另外，本发明操作简便、不会产生二次污染，符合工业生产的需要。同时，本发明的1-二茂铁基-3-[N-（2-取代苯并咪唑基）]-2-丙烯-1-酮化合物具有抗革兰氏菌的作用，能够在制备抗革兰氏菌药物中应用。