本发明涉及基因工程技术领域，旨在提供一种菜蛾盘绒茧蜂抗菌肽防御素基因、抗菌多肽及应用。该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，该基因编码的抗菌多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；将该抗菌多肽去除信号肽前体后还得到的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示的抗菌多肽。本发明还提供了抗菌多肽合成方法及在制备用于治疗革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌感染的食品添加剂或药物中的应用。本发明所提供的菜蛾盘绒茧蜂抗菌肽防御素（Cv-def）基因及其编码的核苷酸序列，使其能够应用在菜蛾盘绒茧蜂中表达的新的抗菌蛋白、编码序列及其在开发成有应用价值的食品添加剂和药物并应用于农业、工业和食品卫生等多个领域。