本发明公开一种重组Exendin-4鼻腔喷雾剂及其制备方法，每100ml制剂中含：10-100mg重组Exendin-4、1mg粘膜渗透强化剂、0.01mg防腐剂、加缓冲液至100？ml、所述的缓冲液组成为20mM？Tri-Cl，pH6.0，含0.8%的NaCl及0.1%的Tween-80。血浆中重组Exendin-4浓度在给药后1小时内比肌肉注射高约20%，2-6小时内是注射的2-70倍，鼻喷雾剂的生物利用度达40%以上，鼻喷雾剂药效长。而且鼻喷雾剂给药血浆中Exendin-4浓度高峰比肌肉注射提前45分钟，说明使用粘膜渗透强化剂壳聚糖更利于重组Exendin-4进入血液。重组Exendin-4鼻喷剂生物利用度高，说明2-型糖尿病治疗除了肌肉注射外，可以利用更加简便有效的鼻腔喷雾的给药物方式；进入血液比注射快，使其作为药物使用时能快速有效降低糖尿病患者的餐后血糖含量。