本发明公开了一种抗PEDF单克隆抗体及其制备方法和应用。本发明所述抗PEDF单克隆抗体的制备方法是用PEDF蛋白免疫BALB/c小鼠，再用免疫鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合，经筛选克隆获得分泌抗PEDF单克隆抗体的杂交瘤株，得到所需单克隆抗体。本发明单克隆抗体可以用于制备治疗PEDF升高的创伤愈合疾病的药物。