本发明涉及一种骨化三醇注射液及其制备方法。该注射液由下列重量百分比的组分制成：骨化三醇0.0005%，葡甲胺1.2-1.6%，聚乙二醇40018-24%，聚乙二醇60001.2-1.7%，抗氧剂0.1%，等渗调节剂适量，注射用水加至100%。该注射液中骨化三醇的含量显著增加，降低了药物的服用量，并且提高了骨化三醇对光、空气的稳定性，其生物利用度也得以显著提高。