一类微管蛋白抑制剂及其合成方法和应用，如式I所示：其中，R为H、邻甲基、间甲基、对甲基、邻氯、间氯、对氯、邻氟、间三氟甲基、间2,4-二氟、间3,4-二氟或间溴间三氟甲基。本发明获得了系列三氟甲基二硝基二苯醚类活性分子，并通过化学合成法获得目的产物，其抗肿瘤活性明显，其中3,4-二氟苯胺衍生物的活性最高，可用于制备抗肿瘤药物。