本发明涉及一种金腰草提取物的制备方法及其应用，属于医药领域。其制备方法是以金腰草为原料，用不同浓度乙醇提取后，通过两次大孔吸附树脂纯化得到，包括金腰草提取物A、金腰草提取物B。该金腰草提取物，可与药学上可接受的载体或其他适宜赋形剂相结合，按照常规方法制成口服给药的剂型。本发明的金腰草提取物可用于制备治疗急性胆囊炎药物。