本发明涉及一种测定血浆中香紫苏醇浓度的方法，属于生物检测技术领域。以硝基安定为内标，采用蛋白沉淀法，通过血浆样品预处理、色谱、质谱和内标法计算得到定血浆中香紫苏醇浓度。本发明方法快速、准确、灵敏度高、操作简便，为香紫苏醇在动物体内的药物代谢动力学研究奠定了方法学基础。