本发明公开了一种新型含色酮结构异噁唑类去甲斑蝥素衍生物及其制备方法与应用，该衍生物的制备是用1,3-偶极环加成方法在去甲斑蝥素结构中C₅和C₆位引入异噁唑环，与色酮衍生物反应导入色酮结构，从而合成一系列的共5个新型的含有色酮结构的异噁唑类去甲斑蝥素衍生物。上述异噁唑类去甲斑蝥素衍生物应用于抗肿瘤药物的合成，具有广阔的应用前景。